Metoda se temelji na novom razumijevanju biologije transfer RNA-ja, posebno na otkrivanju da enzimi aminoacil-tRNA sinteze mogu nabijati tRNA-je s alternativnim 3′ sekvencama. Prethodno je smatrano da je CCA na kraju tRNA-ja jedini dozvoljeni znak za vezanje aminokiselina, ali Radford je pokazao da E. coli aaRS može raditi i s drugim 3′ nizovima. Ovaj napredak otvara mogućnosti za proširenu inženjersku manipulaciju proteinima i sintetičku biologiju.